Il tampone citrato di sodio viene spesso utilizzato per l'isolamento dell'RNA, poiché riduce al minimo l'idrolisi di base dei filamenti di RNA, rendendolo prezioso per la purificazione dell'mRNA durante genomica ricerca e per studiare la trascrizione. I tamponi a base di citrato aiutano anche il rilevamento di antigeni nelle preparazioni di tessuti fissi, perché interrompono i legami incrociati formati tra gli antigeni e il mezzo di fissazione.
Con i seguenti semplici passaggi, è possibile creare un tampone citrato di sodio con un pH di 6 (acido) in meno di 10 minuti.
Materiali per il tampone citrato di sodio
Per produrre il tampone citrato di sodio sono necessari pochi materiali. Con acido citrico, sono necessari solo 1 M di idrossido di sodio, acqua distillata e una sonda pH calibrata. Il citrato di sodio è facoltativo.
La realizzazione del buffer richiede anche un cilindro graduato da 1 litro, un matraccio tarato da 1 litro e tre flaconi per supporti da 1 litro. Infine, avrai bisogno di una barra di agitazione magnetica e di un agitatore magnetico. Tutti questi materiali possono essere trovati a scuola,
laboratori di cantiere o essere acquistato online o nei negozi di specialità.Due opzioni per creare il buffer
Esistono due metodi per produrre tamponi di citrato di sodio, a seconda dei materiali accessibili.
- Se hai sia l'acido citrico che la base coniugata, crea una soluzione madre di ciascuno mescolando 21 grammi di acido citrico in 1 litro di acqua distillata e 29,4 grammi di citrato di sodio in 1 litro di distillato acqua.
- Se hai solo acido citrico a portata di mano, mescola 2,1 grammi in poco meno di 1 litro di acqua distillata.
Miscelazione di acido citrico e soluzioni di citrato di sodio
Mescolare 82 millilitri di soluzione di acido citrico con 18 millilitri di soluzione di citrato di sodio. A questo, aggiungi abbastanza acqua distillata per portare il volume della miscela a poco meno di 1 litro.
Regolazione del pH
Mentre si agita delicatamente la soluzione con un agitatore magnetico, utilizzare 1 M di idrossido di sodio per regolare il pH della miscela su 6,0. Quindi, con un matraccio tarato, aggiungere più acqua distillata per portare il volume totale finale della soluzione a esattamente 1 litro.